19.04.2024
стимуляция регенерации хрящевой ткани в очаге хондромаляции по механизмам механобиологии.
При помощи криомикротома из образцов хрящевой ткани свиньи были изготовлены тонкие срезы толщиной 100 мкм и 200 мкм. Срезы были помещены между 2 предметными стёклами, смоченными изотоническим 0,9 % раствором Nad
13/(f, s, t) с dt = -(sVI(r, s, t)) - -О + [1 s)I(r, s, t) + J p(s, s')I(r, s, t)du’ + s(r, s, t) (1)
На графике коэффициента пропускания для образцов 100 мкм наблюдается разброс ~10% , который, как мы полагаем, связан с неоднородностью свойств образцов, и наличием в
препарате пузырей.
Следует отметить, что при измерении на длине волны 1550 нм ввиду меньшей чувствительности используемых фотодетекторов значительно возрастает погрешность.
На рисунке 5 приведены графики зависимостей для излучения с А=1,55 мкм, рассчитанных методом Монт е-Карло, с использованием оптических параметров, приведенных в таблице 2. Расчет параметров проводился обратным методом Монте-Карло, в качестве функции, описывающей акт рассеяния, использовалась функция Хеньи-Гринштейна
На рисунке 6 показаны зависимости интенсивности лазерных излучений с А=0,97 мкм и АоЗ,55 мкм с глубиной, полученные ин соотношения (5). Видно, что интенсивность более длинниволн ового излучения спадает з начителино быстрее и Для А =1,55 мкм интенсивность уменьшается в два раза по сравиению с начальной уже на глобине ~0.4 мм, а для А=0,97 мкм - ни глубине ~1мм. Прд этом на глубине 1 мм интенсивность излучения с Я =1,55 мкм составляет менее 20% от исходной.
Таким образом при прохождении через толщу хрящевой ткани излучение с длиной волны 0,97 мкм преимущественно не поглощается, и, рассеиваясь, проникает вглубь хряща. При этом мощность постепенно понижается до параметров низкоинтенсивного лазерного излучения, которое, мы полагаем, способно индуцировать регенераторные процессы в хряще и субхондральной кости (куда также проникает) по механизму фотобиомодуляции_[30, 31]. В свою очередь, излучение с длиной волны 1,55 мкм при прохождении через толщу хрящевой ткани преимущественно поглощается в поверхностных отделах, лишь незначительно рассеиваясь и незначительно проникая вглубь хряща.
8. Yusupov V I., Chudnovskii V M., Bagratashvili V N. Laser-induced hydrodynamics in water-saturated biotissues: 2. Effect on delivery fiber. Laser Physics, 2011; 7(21): 1230-1234 Doi:10.1134/S1054660X11140015
12. Mizuno S., Ogawa R. Using changes in hydrostatic and osmotic pressure to manipulate metabolic function in chondrocytes. American Journal of Physiology-Cell Physiology, 2011;6(300): 1234-1245 Doi:10.1152/ ajpcell.00309.2010
Иванников Сергей Викторович - доктор медицинских наук, профессор, профессор кафедры травматологии, ортопедии и хирургии катастроф первого ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), Россия
Байцаева Ольга Игоревна научный сотрудник кафедры лазерной физики Национального исследовательского ядерного университета “МИФИ”, Россия
Коваленко Никита Валерьевич - научный сотрудник НТО ИРЭ Полюс , Россиия
Теги: остеоартроз
234567 Начало активности (дата): 19.04.2024 10:40:00
234567 Кем создан (ID): 989
234567 Ключевые слова: остеоартроз. лазерное излучение, хрящ
12354567899
Поглащение и рассеяние лазерного излучения в суставном хряще при обработке очага
Артроскопическая лазерная обработка суставного хряща является эффективным и перспективным методом лечения остеоартроза
Остеоартроз - одно из наиболее распространённых заболеваний, приводящих к потере трудоспособности. Артроскопическая лазерная обработка суставного хряща является эффективным и перспективным методом лечения остеоартроза, однако её методика может быть улучшена за счёт результатов данного исследования.Цель исследования: экспериментальная оценка коэффициентов поглощения и рассеяния лазерных излучений с длинами волн Х=1.55 мкм и Х=0.97 мкм в тканях суставного хряща и установления роли этих излучений в механизме лазерного воздействия при лечении хондропатии.
Введение
Остеоартроз - болезнь, проявляющееся повреждением суставного хряща, является одним из наиболее распространённых заболеваний, поражающая до 50 % взрослого трудоспособного населения старше 50 лет. Он выражается в появлении на поверхности хряща очагов хондропатии - зон локальной деструкции суставного хряща [1, 2, 3]. Во время артроскопических операций у пациентов с артрозом может выполняться лазерная обработка
очагов хондропатии. Лазерная обработка имеет ряд преимуществ по сравнению с другими типами воздействия, такими как хоолодноплазменная абляция и механическое воздействие [4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21]. В первую очередь такими преимуществами являются: дозированность и высокая точность воздействия, позволяющие свести вероятность повреждений хряща вне обрабатываемой области к минимуму;стимуляция регенерации хрящевой ткани в очаге хондромаляции по механизмам механобиологии.
Авторами был проведен ряд экспериментов по изучению воздействия сочетанного двухволнового излучения 1=0,97 мкм + 1=1,55 мкм на хрящ [22]. Оказалось, что при таком сочетанном двухволновом воздействии необходимый эффект («сглаживание» поверхности хряща) достигается при меньшей суммарной мощности. Было установлено, что в среде 0,9% раствора NaCl эффективное «сглаживание» поверхности хряща при минимальном термическом воздействии на окружающие ткани происходит при использовании двухволнового излучения 1,55 мкм / 5 Вт и 0,97 мкм /3 Вт в импульсно-периодическом режиме (импульс/пауза=100 мс/50 мс) с расстояния 2 мм в течении 2 с [22]. Также было показано, что наибольший вклад в нагрев хрящевой ткани вносит излучение 1=1.55 мкм, по- глощающееся в поверхностных областях, тогда как излучение 1=0.97 мкм поглощается слабее и проникает в более глубокие слои [22].
Для отработки этой и подобных лазерных технологий, для уточнения механизма действия лазерного излучения на биоткани, а также для проведения моделирования необходимы данные об оптических характеристиках суставного хряща в используемых спектральных диапазонах. Целью данной работы являются экспериментальная оценка коэффициентов поглощения и рассеяния лазерных излучений с длинами волн 1=1.55 мкм и 1=0.97 мкм в тканях суставного хряща и установления роли этих излучений в механизме лазерного воздействия при лечении хондропатии.
Материалы и методы
В качестве объектов воздействия использовались образцы суставного хряща свиньи.
При помощи криомикротома из образцов хрящевой ткани свиньи были изготовлены тонкие срезы толщиной 100 мкм и 200 мкм. Срезы были помещены между 2 предметными стёклами, смоченными изотоническим 0,9 % раствором Nad
Для измерения оптических свойств образов был использован «метод подвижных интегрирующих сфер» [25]. По сравнению с классическим методом при котором сферы фиксируются вплотную к образцу [27, 28], данный метод
позволяет значительно повысить точность определения оптических свойств, что обусловлено увеличением количества экспериментальных данных при различных положениях образца [29].Фотография и блок-схема установки представлены на Рисунке 1.
Основу установки составляют лазерный источник 1 FiberLase CR (НТО «ИРЭ-Полюс», Россия) и две интегрирующие сферы (2 и 3) Thorlabs IS200-4 диаметром 8 см с входными портами 12.5 мм. Излучение от источника 1
попадало на клин 4, который отводил часть излучения на измеритель мощности 13, необходимый для контроля мощности лазера. Проходящее через клин излучение диафрагмируется до диаметра 1-2 мм на диафрагмах 5, а также модулировалось чоппером (Thorlabs MC2000B-EC) 6 на частоте 130 Гц. После чоппера излучение с помощью зеркало 7 перенаправлялось во входной порт нижней интегрирующей сферы 2. Пройдя через образец 8, часть излучения, попадало в верхнюю сферу 3. Каждая сфера была оснащена фотодетектором Thorlabs PDA10CS2 (9 и 10), сигнал с которых регистрировался с помощью синхронного детектора, выделяющего сигнал на частоте модуляции излучения (12).Применения метода синхронного детектирования при измерении сигналов с фотодетекторов способствует значительному увеличению точности ввиду исключения влияния электрических и оптических шумов, возникающих вне
частоты модуляции. Поочередное считывания показаний детекторов осуществлялось с помощью мультиплексора 11.В процессе измерения образец располагался на подвижной платформе 16 и с помощью шагового двигателя 15 обеспечивалось его передвижение в пространстве между сферами.
Управление ходом эксперимента осуществлялось с помощью компьютера (PC).
В ходе эксперимента измерялись зависимости PT(LT) и PR(LR), где - PTи P - мощности регистрируемые детекторами верхней и нижней интегрирующих сфер соответственно, LT и LR - расстояния от образца до ближнего порта верхней и нижней сфере соответственно [25].
Полученные значения мощностей нормировались на значения мощности, регистрируемой в отсутствие образца каждой сферой в отдельности. Измеренные нормированные зависимости PT(LT) и Pr(Lr) являются монотонно убывающими функциями.
На больших расстояниях функция PT(LT) стремится к некоторому ненулевому значению, которое соответствует значению коллимированного пропускания.
Оптические свойства биологических тканей определялись при совмещении этих результатов с результатами математического моделирования с использованием численного метода Монте-Карло, подробно описанного в работе [26].
Метод подвижных интегрирующих сфер, представленный в работе, позволяет значительно повысить точность определения оптических свойств. По сравнению с классическим методом, при котором сферы фиксируются вплотную к образцу [27, 28], в данном методе повышение точности обусловлено увеличением количества экспериментальных данных при различных положениях образца [29].
Теоретическая часть:
Описание процессов взаимодействия биологических тканей с лазерным излучением требует знания их оптических свойств. К основным оптическим параметрам биологических материалов следует отнести показатель преломления n(s,X) коэффициенты поглощения р (s,X) и рассеяния р (s,X), фазовую функцию рассеяния p(s, s', X, X'), а также параметр анизотропии рассеяния g(s,X) (средний косинус угла между направлением распространения до и после рассеяния cosd) которые зависят от длины волны X и направления распространения s.
Распространение света в изотропной среде в отсутствие неупругого рассеяния может быть описано уравнением переноса [23]:
13/(f, s, t) с dt = -(sVI(r, s, t)) - -О + [1 s)I(r, s, t) + J p(s, s')I(r, s, t)du’ + s(r, s, t) (1)
где I)r , s, t) - лучевая интенсивност1> [Вт м-2 ср-1] в точке, соответствующей радиус-вектору г, р - коэффициент поглощения, р - коэффициент рассеяния, p(s, Ж ') - фазовая функция рассеяния, Л? S, t) - функция сеисывающая распределение источников св(ста, doc' - т-лесный угол в направлении s . Фазовая функция p(S, В'] описывает рассеивающие свойства среды и прстутавляе- собой функцию плот ности вероятвости для рассеяния в направлении s' фотона, изначально движущегос- в направл-нии Ж, т.е. хса;раьстеризует э лемеутарный акт рассеяния. Если ц-сс еяние си мметрично относительно направления распространения паднющей волны, тогда фазовая функция зависит тнлько от угла в между направлениями В и В', т.е. р(н, ?')= р(в).
Предположение о случайном распределение 'ус-еиваселей в среде означсет отсутствие в структуре биоткани пространственной корреляции,что вриводит к нормировке:
лJ p(e)2nsindde = 1 (2)
Во многих случаях фазовая функция хорошо аппроксимируется функцией Хеньи-Гринштейна [27]:
Р(в) = 7Z1-д24 п ()+g2-2gcos9)3/2'
д =< cosO >= j р(в) ¦ о (3)
д изменяотся от О до 1: соответствует случаю изотропного пропускания ., диффузного оттажения и коаффиционта коллимированного проптскания Т13. Верхний индекс m (измеренный) указывает на эмпирическое происхождение использулмасх сначений. Пеовые два измерения проводятся при помощи установки содержащей одну или две интегуизующие сферы. Конфигурация устанонки схематично покозанаяа нис. 1а.
Измеренные значения Ту Ы?т|преоб]:1а^яД)тся в действительные значения полного пропускания Tt и диффузного отражения Rd с учетом itолученных для интегрирующей сферы корреьций [24].
После п ол учения экспериментальных данных и их коррекции решается система уравнений [24]:Тсс (с, д, т) - Тст = 0
Ttc(c, д, т)
Tt = 0 (4)
Rcd{c,д,т= - Rd = 0
где щит Т это оптическая толщина образца, d, ( гтометричесоая толщина оброзца, с=р/ptн альбедо (исроктериотива диффузной отражательной способности поверхности), и pt=pa+ps -полный (интвгральный) коэффицие т ослабления.
Индекс с (вычисленный, прогнозируемый, аналитический) указывает на то, что значения вычисляются в соответствии с моделью распространения света в среде. Эта система нелинейна относительно оптических свойств т, с и д. Обозначим левую часть системы (4) за F=(F, F2, FJ. Если вклада рассеянного света в измеряемое коллимированное пропускание нет, оптическая толщина т может быть оценена в соответствии с законом Бера и система уравнений (4) уменьшится до двух уравнений для с ид. Если, однако, этот вклад значителен, все 3 уравнения решаются совместно.
С целью исключения случайных и инструментальных погрешностей и повышения точности моделирования использовался комбинированный подход, включавший в себя как стандартные измерения при помощи интегрирующих
сфер, так и гониометрические измерения [25].
Измерения для излучения с А=0,97 мкм проводились на 3 образцах толщиной 100 мкм и одного образца толщиной 200 мкм.
Измерения для излучения с А=1,55 мкм проводились на 2 образцах толщиной 100 мкм и 200 мкм соответственно.
Результаты
Измерения оптических параметров с источником 0,97 мкм
Графики зависимостей нормированных мощностей, регистрируемых верхней (пропускание) и нижней (отражение) сферами от положения образцов представлены на рис. 2 и 3.
На графике коэффициента пропускания для образцов 100 мкм наблюдается разброс ~10% , который, как мы полагаем, связан с неоднородностью свойств образцов, и наличием в препарате пузырей.
Из рис. 2 видно, что для образцов ткани толщиной 100 мкм зависимости коэффициента полного пропускания от положения образца между сферами близки к линейным.
На графике коэффициента пропускания для образцов 100 мкм наблюдается разброс ~10% , который, как мы полагаем, связан с неоднородностью свойств образцов, и наличием в
препарате пузырей.
Из рис. 2 видно, что для образцов ткани толщиной 100 мкм зависимости коэффициента полного пропускания от положения образца между сферами близки к линейным.
Измерения оптических параметров с источником 1,55 мкм
Данные зависимостей нормированных мощностей, реги-стрируемых верхней (пропускание) и нижней (отражение) сферами от положения образца представлены на рис. 3.
Для зависимостей коэффициента полного пропускания наблюдается хорошая повторяемость, что свидетельствует о корректности получаемых данных. Для зависимостей коэффициента диффузного отражения (обратного рассеяния) ошибки измерения становятся довольно значительными, т.к. уровень обратного рассеяния довольно низкий. Следует отметить, что в регистрируемый сигнал вклад вносит также засветка и шум
фотодетектора.
Обсуждение
Ниже, на рисунке 4, приведены графики зависимостей для излучения с 1=0,97 мкм, рассчитанных методом Монте-Карло, с использованием оптических параметров, приведенных в табл. 1 для образца толщиной 200 мкм. Расчет параметров проводился обратным методом Монте-Карло, в качестве функции, описывающей акт рассеяния, использовалась функция Хеньи-Гринштейна.
Подобная закономерность наблюдается также и в работах других авторов [32, 33, 34, 35], хотя числовые значения р и р расходятся в отдельных работах, что можно объяснить различиями в условиях экспериментов, качестве образцов, а также методах измерения.
Выводы
Данный эксперимент позволил нам ответить на воз-никшие ранее в рамках более крупного исследования [22] вопросы. Были определены коэффициенты поглощения и рассеяния лазерных излучений с длинами волн Я=1.55 мкм
и Я=0.97 мкм и на основании полученных данных сделаны следующие выводы:
При прохождении через толщу суставного хряща коэффициент поглощения (р ) у лазерного излучения с Я=0,97 мкм значительно ниже чем у лазерного излучения с Я=1,55 мкм.
При прохождении через толщу суставного хряща коэффициент рассеяния (р) у лазерного излучения с Я=0,97 мкм значительно выше чем у лазерного излучения с Я=1,55 мкм.
При лазерной обработке очага хондропатии сочетанным излучением Я=0,97 мкм + Я=1,55 мкм, излучение Я=1,55 мкм «сглаживает» поверхность суставного хряща в очаге хондромаляции позволяя достигать восстановления структурности суставной поверхности, а параметры излучения Я=0,97 мкм в толще суставного хряща позволяют запустить механизмы фотобиомодуляции в суставном хряще и подлежащей суб- хондральной кости.
Список литературы
1.Glyn-Jones S., Palmer A. J. R. Agricola, AJ Price, TL Vincent,H. Weinans . AJ Carr, Osteoarthritis. Lance., 2015; 386(9991): 376-87 Doi: 10.1016/S0140-6736(14)60802-3
2. Madry H., Kon E., Condello V, Peretti G.M., Steinwachs M., Seil R., Berruto M., Engebretsen L., Filardo G., Angele P (2016) Early osteoarthritis of the knee. Knee Surg Sports Traumatol Arthrosc, 2016;24:1753-1762 Doi: 10.1007/s00167-016-4068-3
3. Корнилов Н. Н., Денисов А. А. Парадигма раннего гонартроза: обзор современных возможностей диагностики и лечения (часть 1) //Терапевтический архив // 2017; 12-2(89):238-243. [Kornilov N. N., Denisov A. A. Paradigma rannego gonartroza: obzor sovremennyh voz-mozhnostej diagnostiki i lecheniya (chast’ 1) Terapevticheskij arhiv 2017;
12-2(89):238-243]4. Иванников С. В Лазерная артроскопическая хирургия (Дегенеративно-дистрофические поражения коленного сустава). Москва, 2001; 19 с. [Ivannikov S. V Lazernaya artroskopicheskaya hirurgiya (Degenerativno-distroficheskie porazheniya kolennogo sustava) Moscow, 2001; pp. 19] Перспективы лечения дискогенных компрессионных форм пояснично-крестцовых радикулитов с помощью пункционных неэндоскопических лазерных операций // Сандлер Б. И. [и др.]. Владивосток. 2004. 181 с.[ Sandler B. I. et al. Perspektivy lecheniya diskogennyh kompressionnyh form poyasnichno-krestcovyh radikulitov s pomoshch’yu punkcionnyh neendoskopicheskih lazernyh operacij Vladivostok
5. Лазерная инженерия хрящей / Баграташвили В. Н. [и др.]. Москва. 2006. 448 с. [Bagratashvili V N. et al. Lazernaya inzheneriya hryashchej Moscow, 2006. 448 p. ]
6.Sobol E. etal. Laser regeneration of spine discs cartilage: mechanism, in-vivo study and clinical applications. Proceedings of Light-Activated Tissue Regeneration and Therapy Conference. Springer, Boston, MA, 2008. Pp. 259-266.
7. Holden P. K. et al. The effects of laser irradiation of cartilage on chondrocyte gene expression and the collagen matrix. Lasers in Surgery and Medicine: The Official Journal of the American Society for Laser Medicine and Surgery, 2009; 7(41):487
8. Yusupov V I., Chudnovskii V M., Bagratashvili V N. Laser-induced hydrodynamics in water-saturated biotissues: 2. Effect on delivery fiber. Laser Physics, 2011; 7(21): 1230-1234 Doi:10.1134/S1054660X11140015
9. Yusupov V. I. et al. Laser-induced hydrodynamics in water-saturated tissue: III. Optoacoustic effects. Laser Physics, 2013; 1(24): 015601
10. Yusupov V I. et al. Generation of acoustic waves by cw laser radiation at the tip of an optical fiber in water. Acoustical Physics, 2016; 5(62): 537-544. Doi:10.1134/S1063771016050183
11. O’Conor C. J., Case N., Guilak F. Mechanical regulation of chondrogenesis. Stem cell research & therapy, 2013; 4(4): 1-13 Doi:10.1186/ scrt211 Fahy N., Alini M., Stoddart M. J. Mechanical stimulation of mesen-chymal stem cells: Implications for cartilage tissue engineering. Journal of Orthopaedic Research, 2018; 1(36): 52-63 Doi :10.1002/jor.23670 Juang Y. M. et al. Proteomic analysis of chondrocytes exposed to pressure. Biomedical Chromatography, 2010:12(24): 1273-1282
12. Mizuno S., Ogawa R. Using changes in hydrostatic and osmotic pressure to manipulate metabolic function in chondrocytes. American Journal of Physiology-Cell Physiology, 2011;6(300): 1234-1245 Doi:10.1152/ ajpcell.00309.2010
13 .Karamesinis K. et al. Continuous hydrostatic pressure induces differentiation phenomena in chondrocytes mediated by changes in polycystins, SOX9, and RUNX2. Journal of Orofacial Orthopedics/Fortschritte der Kieferorthopadie, 2017;1(78):21-31 Doi:10.1007/s00056- 016-0061-1
14. Sobol E. N. et al. Laser-induced regeneration of cartilage. Journal of Biomedical Optics, 2011; 8(6): 080902. Doi:10.1117/1.3614565
15. Alexandrovskaya Y. M. et al. Mechanisms of laser activation of chondrocytes in osteoarthritis healing. Laser Physics Letters, 2018;8(15): 085601 Doi:10.1088/1612-202X/aac746
16. Баум О. И. Механизмы модификации хрящевой ткани и тканей глаза под действием лазерного излучения. Москва. 2016. 22 с.
Информация об авторах:
Лычагин Алексей Владимирович - доктор медицинских наук, заведующий кафедрой травматологии, ортопедии и хирургии катастроф ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)
Юсупов Владимир Исаакович - кандидат технических наук, старший научный сотрудник Института фотонных технологий Федерального научно-исследовательского центра “Кристаллография и фотоника”, Россия
Сурин Владимир Владимирович - аспирант кафедры травматологии, ортопедии и хирургии катастроф ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), Россия
Иванников Сергей Викторович - доктор медицинских наук, профессор, профессор кафедры травматологии, ортопедии и хирургии катастроф первого ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), Россия
Петров Павел Игоревич - ассистент кафедры травматологии, ортопедии и хирургии катастроф ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет), Россия
Коваленко Никита Валерьевич - научный сотрудник НТО ИРЭ Полюс , Россиия
Шевелкина Екатерина Дмитриевна - научный сотрудник НТО ИРЭ, Россия
Заров Алексей Юрьевич - ассистент кафедры травматологии, ортопедии и хирургии катастроф ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет)
Теги: остеоартроз
234567 Начало активности (дата): 19.04.2024 10:40:00
234567 Кем создан (ID): 989
234567 Ключевые слова: остеоартроз. лазерное излучение, хрящ
12354567899
Похожие статьи
Реконструкция тазобедренного сустава у молодых пациентов с диспластическим коксартрозомРентген на дому 8 495 22 555 6 8
Изометрия как предиктор результата остеосинтеза при переломах задних отделов вертлужной впадины
Результаты ревизионного эндопротезирования коленного сустава с применением индивидуальных имплантатов
Среднесрочные результаты лечения перипротезной инфекции с применением спейсеров с углеродным покрытием, импрегнированных серебром